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      使用液相色譜儀的四大關鍵因素

       發布時間:2021-07-27 點擊量:440
        HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。
        液相色譜在使用過程中的四大關鍵因素
        01、液相色譜儀本身:
        對于儀器本身一般不會有問題,特別是剛買回來的新儀器。對于儀器本身最重要的就是儀器的校驗,剛買回來的儀器一般都是由賣家先對儀器做系統的確認工作(包括IQ、PQ、OQ),確認順利通過后,再請國家或省級儀器檢定局的來校驗,檢定合格后就可以放心用了,除此之外,一些做得好的公司每半年會對儀器進行一次的內部校驗,目的就是為了保證儀器的正??蛇\行狀態。
        02、色譜條件:
        色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。流動相就涉及到配制流動相所用到的水和試劑試液,水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級別,試劑試液要求用色譜級別的,原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的干擾。
        色譜柱會因不同的品種而有不同的要求,但每根色譜柱都有它的清洗要求,這個在色譜柱說明書上都可以找到,一定要根據上面的要求進行,否則會造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短,檢測波長也會因品種的不同有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀察檢測器氘燈能量的變化,比如基線波動大,活性成分的響應值突然變小等,都有可能是氘燈的能量不足所引起的,氘燈一般建議使用800小時,但實際上使用時間不止,可根據實際情況更換。
        流速也因品種的不同而不同,一般為1.0ml/min,流速是不可隨意改動的,特別是作為QC人員,但是作為研發人員,有時為了摸索條件或進行方法耐用性驗證,會對流速進行改變以評價方法的適用性。對于進樣量因不同的品種也有不同規定,進樣量這塊現在都使用自動進樣,所以進樣精密度都很好,不需強調什么
        03、操作人員:
        首先,作為液相操作人員,一定要認真學習液相的說明書,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常的維護保養,掌握最基礎故障的排除和維修。一般液相的操作規程也是有操作人員起草的,所以只要嚴格按照操作要求進行操作,一般不會出現問題,當然這里需要特別指出的是對于液相的日常維護保養很重要,比如流動相的過濾、脫氣、泵密封墊的清洗、系統管路的清洗、溶劑過濾頭的清洗等,倘若不堅持,很容易導致色譜柱堵塞、系統壓力過大、色譜峰異常等不必要的故障,浪費時間。其次,操作人員在配制液相分析用樣品溶液時,最好由同一個人單獨完成,以免不必要的偶然誤差。
        04、液相安裝環境:
        液相色譜儀應盡量安裝于水平、遠離振動、電磁干擾的屋內的臺面上,有條件的話盡量將液相數據處理系統分隔開,一個是防止色譜基線噪音偏大,基線不穩等,一個是為減少對人體的危害。

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