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      食品中防腐劑和甜味劑的高效液相色譜儀(HPLC)檢測方案

       發布時間:2020-05-06 點擊量:564

      果汁果膠中防腐劑和甜味劑的高效液相色譜儀(HPLC)檢測方案
      食品加工工藝和防腐的需要,以及為了改善食品品質和色、味、香,在食品生產加工過程中,食品中 通常會加入少量的天然或者化學合成的物質。近幾年,由于食品安全問題層出不窮,人們越來越重視食 品添加劑所帶來的安全隱患。

       

      以下是苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的詳細檢測方法。

      1、儀器與試劑

      1.1 儀器

      高效液相色譜儀

      Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm; 超聲波水浴振蕩器;

      食品粉碎機;

      pH 計;

      天平:分度值為 0.001 mg。

      1.2 試劑

      甲醇:色譜純

      乙酸銨溶液:稱取 1.54 g 乙酸銨,加水溶解并稀釋至 1000 mL,經 0.45μm 微孔濾膜過濾。 亞鐵氰話鉀溶液:稱取 106 g 亞鐵青化鉀[K3Fe(CN)6•3H2O]加水至 1000 mL。

      乙酸鋅溶液:稱取 220g 乙酸鋅[Zn(CH3COO)2•2H20]溶于少量水中,加入 30mL 冰乙酸,加水稀釋至l000mL。

      氨水(1+1):氨水與水等體積混合。

      2、色譜條件

      色譜柱:Vertex C18 柱,250mm x 4.6 mm,5μm; 流動相:甲醇+0.02mol/l 乙酸銨溶液(5:95); 流速:1 mL/min;

      進樣量:20μL; 檢測波長 230nm。

      3、試樣溶液的制備

      3.1 含脂肪、蛋白的樣品

      稱取約 10g 左右樣品于燒杯中(固體樣品要用攪拌機攪碎),加入約 60ml 蒸餾水,再超聲波水浴振蕩10 分鐘,然后用轉移到 100ml 比色管中,并用少量水潤洗干凈燒杯; 加入 5ml 亞鐵氰化價溶液,搖勻,再加入 5 mL 乙酸鋅溶液,搖勻; 根據 PH 計讀數,用氨水調節 PH 至接近中性;用水定容至 100ml 刻度,搖勻,用三角瓶,濾紙,玻璃棒,漏斗過濾; 吸取濾液約 1.5ml,用微孔濾膜過濾,濾液待上機分析。

      3.2 不含脂肪、蛋白的樣品

      稱取約 10g 左右樣品于燒杯中(固體樣品要用攪拌機攪碎),加入約 60ml 蒸餾水,再超聲波水浴振蕩10 分鐘,然后轉移到 100ml 比色管中,并用少量水潤洗干凈燒杯; 根據 PH 計讀數,用氨水調節 PH 至接近中性;用水定容至 100ml 刻度,搖勻,用三角瓶,濾紙,玻璃棒,漏斗過濾; 吸取濾液約 1.5ml,用微孔濾膜過濾,濾液待上機分析。

      注:1-安賽蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精鈉;混合標準溶液色譜圖

      4、結果分析

      4.1 儀器精 確度的測定

      取濃度為苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度為 10.0ug/ml,平行測定 7 次。

      表 1:精 確 度的測定結果

      分析結果可以得出,每個組分峰面積的相對標準偏差均小于 1%,表明儀器在選定條件下重現性好, 完全可以滿足分析測定的要求。

      4.2 回收率的測定

      分析結果的準確度可以用回收率來衡量?;厥章试浇咏?100%,測得的結果越接近真值,即準確度越好。 同時平行測定結果的相對標準偏差可以表明方法的重現性。

      取清涼茶、樣品分別進行加標實驗,加入苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度均為 10.00ug/ml 標 準溶液,平行測樣 7 次,進行回收率實驗。測定結果見表 2。

      表 2:清涼茶的加標測定結果和回收率

      從上表可以看出清涼茶的加標測定的回收率:苯甲酸為 98.5%-103.4%,山梨酸為 98.3%-103.1%,糖 精鈉為 97.5%-104.3%,安賽蜜為 98.4%-103.3%。各組分的回收率都接近 ,滿足日常檢測的要求。

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