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      液相色譜法測定動物組織中抗生素殘留量

       發布時間:2017-03-03 點擊量:1475

         液相色譜法測定動物組織中抗生素殘留量采用EDTA+磷酸(1+1)-三氯乙酸提取,應用C18固定柱富集、凈化,以取得較好的分離效果。然后以保留時間定性,以峰面積定量。具體檢測方法如下:

      樣品的提取

          四環素、土霉素的提取。稱取10.0g樣品于100mL比色管中,加入0.01mol/L EDTA二鈉-0.04mol/l磷酸(1:1)混合液30mL,搖勻,再加入50%三氯乙酸2mL,搖勻,用EDTA-磷酸混合液定容至50mL,樣品液全部轉移至勻漿瓶中,用組織勻漿機高速勻漿1min,勻漿液于45℃以下水浴保溫15min,待靜置分層后,離心10min(2500r/min),上層清液過濾,收集濾液25mL備用。用2mL甲醇潤濕Sep-Pak C18柱,字啊用10ml蒸餾水置換,然后依次用5%EDTA二鈉水溶液5mL、10mL蒸餾水流過。將濾液通過Sep-Pak C18柱,分4次用10mL蒸餾水沖洗,加10mL甲醇溶出,溶出液用液相色譜儀分析。

      氯霉素的提取。

          稱取10.0g樣品于100mL比色管中,加入磷酸鹽緩沖液30mL,搖勻,慢慢加入50%三氯乙酸溶液,用磷酸鹽緩沖溶液定容至50mL,樣品液全部轉移至勻漿瓶,用組織勻漿機高速勻漿1min,室溫下放置15min,過濾,收集濾液,經0.45μm濾膜再過濾,取濾液進行液相色譜分析。

          測定后,比較其峰面積,利用外標法定量。

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